杂交瘤筛选压缩至一周,你会考虑FluorScreen吗?

先上图,一对比,伤害就来了!
杂交瘤筛选革新:FluorScreen 打破有限稀释半世纪技术枷锁
1975 年 Köhler 与 Milstein 成功发明杂交瘤技术,历经近半个世纪迭代,有限稀释法依旧是单抗筛选领域公认的行业金标准,但在生物药企降本增效的大趋势下,这项经典技术逐渐沦为制约项目进度的枷锁。
传统有限稀释全流程筛选耗时长达 5~10 周,繁琐重复操作挤占大量人力成本;伴随单抗研发提速、项目交付周期不断压缩,低效的筛选模式已经难以适配现阶段产业化研发需求。
上海雅酶自研 FluorScreen 荧光筛选半固体培养基,突破性将杂交瘤筛选周期压缩至 1~1.5周,重构单抗单克隆筛选新标准。
Part.01
有限稀释法的“枷锁”
有限稀释法三大先天短板,研发成本持续承压
1.1 周期冗长,人力耗材双重资源黑洞
有限稀释法需开展 2~3 轮连续亚克隆,单轮亚克隆耗时 10~15 天,整体筛选周期可达 1~2 个月。实验全流程包含铺板、换液、标记、显微镜检等海量重复性手工操作,人力损耗严重;该方法单克隆成型率仅 60%~70%,大量空孔、多细胞混合孔频发,导致实验频繁返工,耗材与时间成本持续攀升。
1.2 优胜劣汰失衡,优质高产株悄然丢失
常规液体悬浮培养体系中,杂交瘤细胞自由竞争养分,增殖速度快但抗体表达偏低的劣势细胞会抢占营养、抑制生长缓慢、产能优异的目标高产株,最终科研人员筛选时极易丢失核心冠军株,直接造成最终成品抗体产量不足、品质下滑。
1.3 筛选误差偏高,假阳性拖累项目进度
传统配套 ELISA 固相筛选假阳性率超 20%,初筛判定阳性的克隆需要多轮重复复测验证,筛选结果不可控,拉长整体研发排期。
沿用现状:门槛低是优势,却跟不上产业增效需求
有限稀释法能够沿用至今,核心在于技术原理成熟、入门操作简单、配套仪器投入少,中小实验室落地门槛低。但当下生物医药行业内卷加剧,增效 = 降本、高效 = 核心竞争力,耗时耗力的传统筛选方式,已经无法满足企业规模化、快速化的单抗开发诉求。
Part.02
FluorScreen半固体培养基
从传统半固体到 FluorScreen,一站式优化筛选难题
2.1 初代改良:传统半固体优化周期,却困于实操门槛
为改善有限稀释耗时弊端,初代半固体筛选技术应运而生,可将筛选周期缩短至 2~3 周。但调研一线实验操作员反馈,传统甲基纤维素配制可控性极差:添加量偏高,半固体内压过大易引发细胞死亡;添加量偏低,培养基质地过稀,细胞自由游走聚团,无法形成真正单克隆,实操容错率极低,落地普及受限。
2.2 产品革新|雅酶 FluorScreen 即用型培养基,两大核心技术破局
雅酶 FluorScreen 杂交瘤快速荧光筛选半固体培养基,整合传统半固体筛选周期优势,彻底解决甲基纤维素配制难题,成品为开瓶即用剂型,依托甲基纤维素半固体基质 + 荧光抗原示踪双核心技术,重塑杂交瘤单克隆筛选逻辑。
① 半固体基质隔离:克隆独享生长空间,杜绝细胞恶性竞争单个杂交瘤细胞被固定在半固体基质内原位增殖,形成物理隔离的独立单克隆集落,细胞间互不接触、无营养争夺,高产慢生的优质细胞株得以稳定存活,细胞天然抗体分泌能力完整保留,从根源规避优势株遗失问题。
② 荧光抗原示踪显色:阳性克隆可视化,精准锁定目标株荧光标记抗原(FITC/488/555/GFP等荧光体系)预先混匀在半固体培养基内,能特异性分泌目标抗体的克隆,会在菌落外围形成一圈特征性荧光晕圈,如同暗夜路灯精准标记阳性位置,肉眼配合荧光显微镜即可直观分辨,阳性克隆无处隐匿。
2.3 技术对标|FluorScreen VS 传统 ELISA,多维度性能全面升级
雅酶FluorScreen
ELISA筛选
抗原状态
半固体液相,天然构象完整保留
固相包被,构象易改变
检测方式
直接荧光,一步完成
间接显色,步骤繁琐
信息维度
克隆定位,分泌能力直观评估
仅知阴阳,不知位置
2.4 核心产品优势汇总
① 省时省工:单克隆分离 + 阳性筛选同步一步完成,无需多轮亚克隆,大幅压缩工时,同时兼容初筛、亚克隆全场景;
② 表位保真:液相环境抗原抗体自然结合,筛选结果更贴合体内真实结合状态,优于传统固相 ELISA;
③ 可视溯源:依托荧光晕圈直观筛选阳性克隆,根据荧光信号强弱预判抗体表达水平,近乎零假阳性,杜绝优质克隆意外流失。
2.5 全周期数据对比
传统有限稀释
雅酶FluorScreen
FluorScreen
优势分析
筛选周期
1.5~2.5个月
9天(一步筛选)
周期更短
假阳性率
>20%
乎无假阳性
假阳性率更低
筛选与克隆
不可一步完成
一步完成
筛选与克隆一步完成,周期短成本低
Part.03
应用案例
三类抗原真实应用案例,验证产品落地可靠性
案例1:荧光标记真核重组抗原筛选
抗体靶点:CD63
细胞密度(初筛):1×10⁶个/孔(6孔板)
荧光抗原浓度:50~100nM
结论:如图1所示,融合后初次筛选,一步筛选得到阳性单克隆细胞株。
A
B
图1. 单克隆细胞株279-1C1和279-1E1的分离。(A)阳性克隆图像。(B)单克隆细胞株279-1C1和279-1E1培养上清的ELISA验证。
案例2:原核重组抗原筛选
抗体靶点:GFP
细胞密度(亚克隆):500个/孔(6孔板)
荧光抗原浓度:50~100nM
结论:如图2所示,亚克隆筛选得到阳性单克隆细胞株。
A
B
图2. 单克隆细胞株mR1-001-8的分离。(A)阳性克隆图像。(B)单克隆细胞株mR1-001-8培养上清的ELISA验证。
案例3:荧光标记多肽抗原筛选
抗体靶点:Integrin alpha 4/CD49D
细胞密度(亚克隆):500个/孔(6孔板)
荧光抗原浓度:50~100nM
结论:如图3所示,亚克隆筛选得到阳性单克隆细胞株。
A
B
图3. 单克隆细胞株162-2-1D1的分离。(A)阳性克隆图像。(B)单克隆细胞株162-2-1D1培养上清的ELISA验证。
Part.04
欢迎合作
产品规格、试用申请与咨询订购
4.1 产品基础参数
产品货号:RZ201
产品全称:FluorScreen™杂交瘤快速荧光筛选半固体培养基
包装规格:100mL / 瓶
市场售价:5800 元
配方组成:精制甲基纤维素、灭活血清、HAT 筛选体系、青链霉素双抗、酚红指示剂及杂交瘤细胞专属增殖营养添加剂;
适用范围:小鼠杂交瘤细胞初筛、亚克隆全流程筛选。
4.2欢迎咨询试用